Homogénéisateur ultrasonique de perturbation cellulaire pour le laboratoire

Procédé de préparation d'échantillons de protéines à l'aide d'un homogénéisateur ultrasonique à rupture de cellules :

Le processus de préparation des échantillons de protéines se compose de trois étapes: briser, précipiter les protéines et éliminer les impuretés.

Il y a beaucoup de façons de casser. Permettez-moi de vous présenter les avantages de l’utilisation du processeur ultrasonique Cell Disruption pour la fracture par ultrasons.

Concassage ultrasonique:

1. Minimiser la protéolyse et inhiber la dégradation de la protéase.

2. Réduire les effets des températures de processus de fonctionnement ou d'autres conditions physico-chimiques sur la dénaturation des protéines.

3. Réduire la contamination en acides nucléiques par électrophorèse et autres analyses.

Principe du broyeur à ultrasons:

L'entrée d'ondes ultrasonores à haute énergie peut casser les cellules et le mécanisme peut être lié au phénomène de cavitation de génération de bulles, de croissance et de fragmentation lorsqu'une forte onde acoustique agit sur la solution. Les ondes de choc et les forces de cisaillement causées par la cavitation provoquent la lyse des cellules. L'efficacité de la sonication dépend de la fréquence, de l'énergie sonore, du temps de traitement, de la concentration et du type de cellule.

Étapes expérimentales:

1. Préparer la suspension cellulaire, le tampon, le processeur cellulaire à ultrasons

2. Le tissu lavé est coupé en petits morceaux à l'aide d'un agitateur, mis en suspension dans au moins deux fois le volume du tampon; les cellules de la solution de culture sont lavées (les bactéries sont mises en suspension dans au moins deux volumes du tampon);

3. La sonde à ultrasons est immergée dans la suspension pour la sonication. En général, la durée totale des ultrasons est divisée en plusieurs cycles, tels que 4 x 30 s, et l’échantillon est laissé refroidir dans un bain de glace entre les cycles.

Précautions

1. La perturbation par ultrasons est couramment utilisée dans divers homogénats de bactéries et de tissus cérébraux. Selon les circonstances, le temps de broyage peut être prolongé de manière appropriée, généralement pas plus de 10 minutes.

2. Vérifiez l'efficacité de la rupture cellulaire avec la microscopie à contraste de phase.

3. Un point à noter sur la perturbation par ultrasons est que la sonde doit rester sous la surface de la suspension tout au long du processus.

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