Étapes expérimentales pour la levure cassée

Matériel expérimental: levure, tampon phosphate de sorbitol (Na2HPO4: NaH2PO4 = 77,4: 22,6), enzyme de l'escargot et cellulase.

Procédure expérimentale: 2 ml de solution bactérienne ont été prélevés dans un tube collecteur de 2,5 ml, centrifugés à 12 000 tr / min pendant 1 min, et le surnageant a été éliminé et la procédure a été répétée une fois. Remettre en suspension les cellules en ajoutant 1 ml de tampon dans le tube à centrifuger, puis prendre 20 ul de la solution bactérienne. Observez la morphologie initiale de la paroi cellulaire des cellules de levure au microscope optique, puis disposez la solution enzymatique (enzyme escargot: cellulase = 50: 10 ul). Bain-marie dans un bain-marie à 37 degrés pendant 1 h (pendant la période de prévention de la précipitation des bactéries, le tube à centrifuger peut être agité régulièrement)

Une fois le bain-marie terminé, 20 µl de liquide bactérien ont été prélevés dans un tube à centrifuger pour observer les modifications morphologiques de la paroi cellulaire et de la membrane cellulaire de la cellule de levure au microscope optique, puis le pulvérisateur de cellules ultrasoniques a été utilisé pour rompre le liquide bactérien dans le tube à centrifuger, et la procédure spécifique a été mise au pouvoir. 300w, temps de travail 10min, ultrasons ouverts 3S, ultrasons hors 3S, température d'alarme de 70 degrés, les paramètres spécifiques peuvent être ajustés en fonction de la situation réelle, après la prise par ultrasons du liquide bactérien destiné à la fabrication de la dernière pièce au microscope optique pour observer la paroi cellulaire de la levure et les changements morphologiques de la membrane cellulaire.

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